DAPI

Šablona:Infobox Chemická sloučenina DAPI (4',6-diamidin-2-fenylindol) je fluorescenční barvivo, které se pevně váže na AT bohaté oblasti v DNA.^[1] DAPI se pro svou silnou fluorescenci a schopnost procházet buněčnou membránou běžně používá ve fluorescenční mikroskopii pro obarvení buněčných jader.

Mechanismus fluorescence

Epiteliální buňky s DNA obarveným modře pomocí DAPI a cytoskeletem obarveným zeleně a červeně pomocí imunofluorescence.

Po vazbě DAPI na DNA se až 20× zesiluje intenzita fluorescence, protože nedochází ke zhášení fluorescence molekulami vody v roztoku. Při vazbě na dvouvláknovou DNA má DAPI excitační maximum při 358 nm (ultrafialové světlo) a emisní maximum při 461 nm (modrá). DAPI se váže nejsilněji na úseky DNA bohaté na AT, kde se váže v poměru 1 molekula DAPI na 3 AT-páry.^[1] Kromě toho se DAPI může vázat i na RNA, i když fluorescence je výrazně slabší a emisní maximum je posunuto k 500 nm.

Související články

Reference

V tomto článku byl použit překlad textu z článku EDTA na anglické Wikipedii.

↑ ^a ^b KAPUŚCIŃSKI, J.; SZER, W. Interactions of 4', 6-diamidine-2-phenylindole with synthetic polynucleotides.. Nucleic Acids Res. Aug 1979, roč. 6, čís. 11, s. 3519-34. PMID 493113.

[Kapuściński-1979-1] KAPUŚCIŃSKI, J.; SZER, W. Interactions of 4', 6-diamidine-2-phenylindole with synthetic polynucleotides.. Nucleic Acids Res. Aug 1979, roč. 6, čís. 11, s. 3519-34. PMID 493113.

[1]