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Acasuso strebte ursprünglich eine Karriere als Basketballer an. Jedoch begann er mit zwölf Jahren das Tennisspielen und war von 1999 bis 2012 Profi-Tennisspieler auf der ATP World Tour, auf der er drei Turniersiege erringen konnte. Am 24. Februar 2012 trat er im Alter von 29 Jahren im Rahmen der Copa Claro 2012 vom Profitennis zurück.[1]
Seine beste Platzierung in der Tennis-Weltrangliste erreichte er im August 2007 als Nummer 20.